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基礎信息Product information
產品名稱：
染料法熒光定量PCR試劑盒（上海研生）
產品簡介：
染料法熒光定量PCR試劑盒運輸及保存：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區域操作。
產品型號：
廠商性質：經銷商
訪問量：718
更新時間：2023-06-12
產品特性Product characteristics
相對定量分析方法 ：
2-ΔΔCt
染料法熒光定量PCR試劑盒前提：目標序列和內參序列的擴增效率接近100％且偏差在5％以內
1、用內參基因的CT值歸一目標基因的CT值：
ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test）
ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator）
2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值：
ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
3、計算表達水平比率：
2 –ΔΔCT=表達量的比值
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
具有下列特點：
1.根據 指標的保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
2.靈敏度比常規 PCR 高 2-3 個數量級，可以達到幾百拷貝/反應。
3.即開即用，用戶只需要提供樣品模板，操作簡單，定量準確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6.本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
Inhibin alpha antibody [EPY2782]原裝、分裝型肝炎核心抗原（HBV）（18-27）
Inhibin alpha antibody [EPY2782]原裝、分裝型肝炎病毒核心（107-115）
SRPRB antibody原裝、分裝型肝炎病毒核心，（型肝炎抗原31）
TMEM35 antibody原裝、分裝型肝炎病毒核心蛋白（128-140）
PIEZO2 antibody原裝、分裝型肝炎病毒膜蛋白（183-191）
tenomodulin antibody原裝、分裝型肝炎病毒膜蛋白（335-343）
JAM-C antibody原裝、分裝型肝炎病毒聚合酶（455-463）
Human SLC5A4 peptide原裝、分裝型肝炎病毒聚合酶（502-510）
IRHOM1 antibody原裝、分裝型肝炎病毒聚合酶（655-663）TIMP1 antibody [EP1549RY]原裝、分裝胃泌素釋放肽，人
AKT1 (phospho S473) antibody [EP2109Y]原裝、分裝胃泌素釋放肽，豬
AKT1 (phospho S473) antibody [EP2109Y]原裝、分裝胃泌素釋放肽-Lys（生物素），人
AKT1 (phospho S473) antibody [EP2109Y]原裝、分裝胃泌素釋放肽（1-6），人
Phospholipase C gamma 1/PLC-gamma-1 (phospho Y1253) antibody [EP1502Y]原裝、分裝胃泌素四肽
Phospholipase C gamma 1/PLC-gamma-1 (phospho Y1253) antibody [EP1502Y]原裝、分裝胃饑餓素，人
Phospholipase C gamma 1/PLC-gamma-1 (phospho Y1253) antibody [EP1502Y]原裝、分裝胃饑餓素，大鼠
MMP26 antibody [EP1283Y]原裝、分裝生長激素釋放子，小鼠
MMP26 antibody [EP1283Y]原裝、分裝生長激素釋放子，綿羊
染料法熒光定量PCR試劑盒基質金屬蛋白酶9/明膠酶B檢測試盒20mg
基質金屬蛋白酶抑制子2檢測試盒20mg
基質金屬蛋白酶抑制子3檢測試盒20mg
基質金屬蛋白酶抑制子4檢測試盒20mg
基質金屬蛋白酶組織抑制子1檢測試盒5mg
基質裂解蛋白/基質溶素檢測試盒50mg
基質細胞衍生子1a檢測試盒20mg
基質細胞衍生子1β檢測試盒100mg
激動異構酶/細胞分裂素MB檢測試盒0.2ml
注意事項：
1. 建議使用新鮮采取的動物組織，若為長期冷凍組織，應盡量避免反復凍融，否則會導致模板的降解，影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存，易產生沉淀。在使用前務必將其在室溫中放置一段時間，也可在37℃水浴中預熱10 min，以溶解沉淀，混勻后再使用。
3. 電泳檢測時，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則，電泳時會在泳道中出現一大團拖尾亮帶，影響實驗結果。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內，以便擴增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
